as自由基清除能力测定法_abts自由基清除实验原理

1.高粱谷粒中的酚类物质较丰富主要是以什么为主

2.自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示

3.dpph自由基清除原理

设计实验都还要做空白对照、阳性对照和实验组。你把“一是用苹果作为对照，一种涂上该物质，一种没有”还要加一种本来就具有抗氧化的物质“涂在苹果上”才能显示出你要测定的物质是否具有抗氧化活性撒！测定抗氧化的方法很多的！除了看其对自由基的清除作用，测定油脂的过氧化也是很不错的方法！...

高粱谷粒中的酚类物质较丰富主要是以什么为主

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)生于白桦、银桦、榆树、赤杨等活立木的树皮下或砍伐后树木的枯干上,其菌核可以在砍伐后的枯干上生存达6年之久。它主要分布在北美(北部)、芬兰、波兰、俄罗斯(西伯利亚、远东部分地区、勘察加半岛)、中国(黑龙江省、吉林白山地区)、日本(北海道)等国家。俄罗斯人认为,桦褐孔菌是上帝赐给苦难人类的一种神奇的礼物,可用来防治肝癌、艾滋病、0-157大肠杆菌中毒。日本的研究人员高度评价桦褐孔菌,称其为一种“万能药”。

1955年莫斯科医科院(The Medical Academyof Science in Moscow)宣布桦褐孔菌为抗癌物质,批准桦褐孔菌可用于医药品开发。美国把桦褐孔菌列入“特殊的天然物质”,作为宇航员的未来饮品。日本则把桦褐孔菌作为肝癌、艾滋病和0-157大肠杆菌中毒的治疗剂,并申请多项有关桦褐孔菌的专利。

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是主要产于俄罗斯的一种药用型真菌,包含多种活性物质如羊毛甾醇三萜类、桦褐孔菌醇、桦褐孔菌素、多糖、木质素、生物碱、栓菌酸和黑色素等。桦褐孔菌被应用于各种疑难杂症,其入药部位主要是菌核,大量药理实验表明其有抗氧化、调节血脂、抗癌症(肝癌、胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、直肠癌)、治疗糖尿病、抗、抗衰老和增强免疫力等作用。

桦褐孔菌的功能特性：

1、抗癌作用

用MTT法检测桦褐孔菌多糖对Jurkat和Daudi细胞增殖的影响,建立Jurkat荷瘤裸鼠模型,研究给药后对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。表明桦褐孔菌多糖在体外具有直接杀死Jurkat和Daudi肿瘤细胞的作用,最高抑制率分别为62.29%和66.42%,具有良好的剂量-效应关系,同时具有显著的体内抗肿瘤活性,大小剂量对Jurkat荷瘤的抑制率分别为43.52%和57.48%,并且能显著提高裸鼠的脾脏指数,桦褐孔菌多糖具有显著的抗肿瘤活性和增强免疫功能。

2、护肝作用

通过桦褐孔菌多糖作用在荷瘤鼠身上，发现桦褐孔菌多糖(IOPS)对正常肝细胞LO2细胞无明显抑制作用，桦褐孔菌多糖(IOPS)可明显改善荷瘤鼠肝细胞的变形坏死,具有显著的保肝作用。

3、降血糖作用

实验表明桦褐孔菌多糖有效缓解糖尿病小鼠体重下降、血糖升高的症状,提高小鼠血浆胰岛素、丙酮酸激酶活性,促进葡萄糖的吸收,加速糖代谢。桦褐孔菌胞内多糖显著提高小鼠肝脏、肌肉糖原合成,抑制糖原降解,增加组织糖原含量,借此推断桦褐孔菌可能是通过影响体内葡萄糖吸收、摄取、代谢、降解等过程,抑制糖原代谢,加速糖原合成,同时增加外周组织糖消耗,达到降低小鼠血糖的目的。

4、抗氧化

利用FRAP、DPPH·、ABTS+·三种方法测定其抗氧化活性。实验表明桦褐孔菌黄酮类化合物浓度为200μg/m L时,其总抗氧化能力相当于464.53μmol/L Fe SO4。对DPPH自由基清除率的EC50为36.44μg/m L;对ABTS+自由基清除率的EC50为299.89μg/m L。桦褐孔菌中黄酮类化合物对DPPH·和ABTS+·的清除率接近维生素C（VC）,具有较强的抗氧化活性,有潜力作为天然抗氧化剂推广应用。

5、调节免疫力

研究发现,桦褐孔菌的水提取液可使LDH、HBDH、MDH、GCT的活性降低,过氧化氢酶的活性增强,可清除体内的自由基,保护细胞、延长传代细胞的分裂代数,增进细胞寿命,促进代谢,因而能有效地延缓衰老,长期服用可延年益寿。

6、其它作用

日本有关报道指出,桦褐孔菌对呕吐、腹泻、胃肠功能紊乱、胃及十二指肠溃疡、肝炎、胃炎和肾炎有一定的治疗作用。对因不合理的饮食而导致的骨质方面的疾病有一定的预防和治疗作用。桦褐孔菌还可防治高血压,而且是血液的清洁剂和疼痛的缓解剂,对皮肤过敏也有一定的疗效。

自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示

高粱谷粒中的酚类物质比较丰富,主要以游离酚为主。

1、本文提取了高粱糠中的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚,用高效液相色谱法测定其中15种酚类化合物的含量,并对抗氧化能力进行研究,其中包括DPPH自由基、ABTS自由基、O2-自由基清除率的测定,以及Fe3+还原力的测定实验等。

实验结果表明:

1、本实验研究的高粱糠的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚的含量分别为645.27、138.57、48.67、118.92、176.06?mg?GAE/100?g?DW;阿魏酸和水杨酸的含量较高,分别为39.04%和28.04%,3,4-二羟基苯甲酸的含量最低(0.09%);阿魏酸主要以束缚型的形式存在。

2、可溶性酚中的异绿原酸的含量较高,而游离酚中水杨酸的含量最高;不同存在形态的酚类物质的抗氧化能力在不同的抗氧化体系中略有差异,总的来说,束缚型酯型酚、束缚型苷型酚、可溶性酯型酚的抗氧化能力较强,虽然游离酚含量最高,但其抗氧化能力较弱。

dpph自由基清除原理

1)ABTS+.自由基清除能力的测定

ABTS+.自由基的制备：

将7mmol／L ABTS储备液和2．45mmol／L高硫酸钾(最终浓度)混合，在室温、避光的条件下静置过夜，形成ABTS”自由基储备液。使用前用O．1mol／L磷酸盐缓冲液(pH7．4)稀释成工作液，使其在734nnl处的吸光值为O．70-O．02。

绘制标准曲线：

配制一系列浓度的Trolox溶液(0—3mmol／L)。20uL不同浓度的Trolox溶液与2mLABTS+.工作液混合，反应6min后在734nm读取吸光值，以Trolox溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线

ABTS+.自由基清除能力测定：

20uL消化液与2 mLABTS+.工作液混合，反应6min后在734 nln读取吸光值。ABTS+.自由基清除能力用Trolox等价抗氧化能力表示(TEAC，umol／L)。

请问下各位大侠，ABTS+.自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示。最好举个例子，

dpph自由基清除原理：

DPPH自由基有单电子在517nm处有一强吸收其醇溶液呈紫色的特性，结论， DPPH法名称:1，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍。

中文名：22联氮二(3乙基苯并噻唑6磺酸)二铵盐别名：22’连氮基双(3乙基苯并二氢噻唑啉6磺酸)分子式：C18H24N6O6S4分子量：54868ABTS法是使用最广泛的间接检测方法，当有自由基清除剂存在时由于与其单电子配道对而使其吸收逐渐消失其褪色程与其接受的。

dpph性质应用：

DPPH具有几个不同结晶形态，它们的晶格对称性和熔点(m.p.)存在差异。商品化的粉末是不同晶相的混合物，熔点在130℃附近。DPPH-Ⅰ(m.p. 106℃)是正交晶系，DPPH-Ⅱ(m.p. 137℃)是无定形态，DPPH-Ⅲ(m.p. 128-129℃)是三斜晶系。

DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的ππ共-轭作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获("清除")其他的自由基。

因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。由于DPPH自由基在以300~400之间为中心处具有强烈的吸收，因此在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅**。

利用这一特性可以直观地检测反应的过程，通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。